1 (08-02-2013 09:31:36 отредактировано Galrad)

Re: Белок E6, E7

Мы уже затрагивали иммунохмическую диагностику, на основе определения протеина p16INK4a, котрый является ингибиторам репликации клеточной ДНК, пораженных ВПЧ и имеющего сродство к белку E7. 
Скрининговыми эти методики не стали из-за высокой стоимости проводимых исследований.
В последнее время, в лабораториях стали делать пробы на белок E6, E7, стоимость которых в несколько раз ниже.
Мазок берется классически, цервикальной щеточкой в специальную пробирку с средой.
Становится вполне целесообразным исследование на наличие  белков E6, E7. если выявлены ВПЧ тип 16, 18.

Информация по белкам E6, E7, в последнее время, стала доступна и в сети...

На основе рекомбинантных белков и моноклонов к различным детерминантам этих белков создана диагностическая иммуноферментная тест-система для выявления белка E7 ВПЧ в цервикальных пробах (Patent W000506645; Patent U5679509).

Пилотные наборы были использованы в нескольких достаточно крупных исследованиях в которых подтвердили предположение о ведущей роли ВПЧ в цервикальном канцерогенезе, вызывающего активную выработку вирусных онкобелков. В частности, у 75% из 16 обследованных пациенток с раком шейки матки, подтверждённом морфологически, выявлен онкобелок E7. Другая группа исследователей методом ИФА обнаружила белок E7 у 22 из 57 обследованных пациентов с различными клиническими диагнозами: эрозиями шейки матки с лейкоплакией, папилломатозом, дисплазией шейки матки и др.

Таким образом, метод детекции уровня онкобелка E7 (E6) – маркера малигнизации при инфицировании эпителиальных клеток слизистой ВПЧ – может оказаться надёжным инструментом ранней диагностики, а по снижению концентрации тира ВПЧ в исследуемой пробе можно оценивать эффективность терапии ПВИ.
Оптимальным алгоритмом (протоколом) лабораторной диагностики ПВИ, на мой взгляд, является проведение ПЦР-анализа с типированием ВПЧ и, при получении положительных результатов, - ИФА с целью детекции онкобелков (E6 и E7). Цитологические и кольпоскопические исследования могут, при высокой квалификации специалистов, быть полезны для оценки состояния слизистых инфицированных органов. Весьма целесообразно при комплексном клинико-лабораторном обследовании пациентов с подозрением па ПВИ получить достоверную информацию о наличии (отсутствии) хламидий, цитомегаловируса, вируса простого герпеса и других возбудителей ИППП, а также, с учётом мощной иммуносупрессивной потенции онкобелков, о состоянии клеточного и гуморального иммунитета.

2

Re: Белок E6, E7

Краткие сведения про белок E7:

Продуктом гена E7 является сравнительно небольшой фосфобелок, содержащий 98 аминокислот.

N-Концевой домен этого белка (аминокислоты 1-38) содержит в основном гидрофильные аминокислоты, в то время как  С-концевой домен (аминокислоты 39-98) более гидрофобен. Несмотря на расчетную молекулярную массу (11 кДа) белок E7 HPV 16 мигрирует при электрофорезе в полиакриламидном геле как молекула с массой 18-20 кДа [ Armstrong D. and Roman A., 1993 ].

E7 структурно и функционально родственен белкам других ДНК-содержащих вирусов, таких как большой Т-антиген  вируса SV40 и ранний  белок E1А  аденовируса .

Белок E7 может быть разделен на три основных домена -  консервативный участок 1 ( CR1 ),  консервативный участок 2 ( CR2 ) и  консервативный участок 3 ( CR3 ). Все три домена необходимы для проявления биологической активности E7 [ Vousden K. and Yat P., 1989 ].

Известно, что белок Е7 вируса папилломы человека типа 16 инактивирует белок-супрессор опухолевого роста Rb, кодируемый  геном ретинобластомы , а  белок Е6 вируса папилломы человека типа 18 , гомологичный  большому Т-антигену вируса SV40 , инактивирует  белок-супрессор опухолевого роста р53 , кодируемый  геном TP53 .

Наличие каждого из этих вирусных белков (Е6 и Е7) - необходимое и достаточное условие злокачественного перерождения клеток in vitro.


P.S. В лабораториях нередко пишут какой фрагмент был обнаружен: CR1, CR2 или CR3. Нас больше интресует фрагмент  CR2.